Quelles sont les différentes techniques de séparation des molécules biologiques dans une cellule ?

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La séparation des molécules biologiques cellulaires se fait principalement par chromatographie. Différentes méthodes existent, incluant la chromatographie en phase inverse (RP), par échanges dions (IEX), daffinité (AFC), dexclusion stérique (SEC), à interactions hydrophobes (HIC) et hydrophiles (HILIC). Chacune exploite des principes différents de séparation.
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Techniques de Séparation des Molécules Biologiques dans une Cellule

La séparation des molécules biologiques, telles que les protéines, les acides nucléiques et les lipides, est essentielle pour l’étude et l’analyse des cellules. Les techniques chromatographiques sont largement utilisées pour effectuer ces séparations.

Chromatographie en Phase Inverse (RP)

La RP est une technique de séparation basée sur les interactions hydrophobes entre les molécules et une phase stationnaire hydrophobe. Les molécules plus hydrophobes sont retenues plus fortement sur la phase stationnaire et s’éluent plus tard que les molécules plus hydrophiles.

Chromatographie par Échanges d’Ions (IEX)

L’IEX sépare les molécules en fonction de leur charge nette. La phase stationnaire est chargée positivement ou négativement, et les molécules de charge opposée sont retenues par des interactions électrostatiques.

Chromatographie d’Affinités (AFC)

L’AFC utilise des ligands spécifiques pour se lier à des molécules cibles. Les molécules cibles sont retenues sur la phase stationnaire par les interactions avec les ligands, tandis que les molécules non liées sont éluées.

Chromatographie d’Exclusion Stérique (SEC)

La SEC sépare les molécules en fonction de leur taille. La phase stationnaire est constituée de pores de différentes tailles, et les molécules plus petites pénètrent dans les pores et sont éluées plus tard que les molécules plus grosses.

Chromatographie à Interactions Hydrophobes (HIC)

La HIC utilise des phases stationnaires contenant des ligands hydrophobes pour retenir les molécules. Contrairement à la RP, le milieu mobile est aqueux et contient des sels pour induire des interactions hydrophobes.

Chromatographie à Interactions Hydrophile (HILIC)

La HILIC inverse les phases mobiles et stationnaires utilisées dans la HIC. La phase stationnaire est hydrophile, tandis que le milieu mobile contient des solvants organiques. Cette technique est utilisée pour séparer les molécules polaires.

En conclusion, diverses techniques chromatographiques exploitent différents principes de séparation pour séparer les molécules biologiques dans une cellule. Le choix de la technique dépend des propriétés des molécules cibles, de la précision requise et des contraintes expérimentales.