Comment fonctionne la chromatographie sur colonne ?

Comment fonctionne la chromatographie sur colonne

La chromatographie sur colonne est une technique de séparation qui utilise une colonne verticale remplie d’une phase stationnaire solide. La séparation est basée sur les différences d’affinité des composés du mélange pour la phase stationnaire et l’éluant.

Principe de fonctionnement

Une colonne en verre munie d’un filtre et d’un robinet est remplie d’une phase stationnaire solide, telle que l’alumine ou la silice. Le mélange à séparer est déposé en haut de la colonne. Un éluant, généralement un solvant ou un mélange de solvants, est ensuite ajouté au sommet de la colonne.

L’éluant entraîne les composés du mélange à travers la colonne. Les différents composés migrent à des vitesses différentes en fonction de leurs affinités pour la phase stationnaire et l’éluant. Les composés ayant une plus grande affinité pour la phase stationnaire se déplacent plus lentement que ceux ayant une plus faible affinité.

Élution

L’élution consiste à collecter les différents composés séparés au fur et à mesure qu’ils sortent de la colonne. Cela se fait à l’aide d’un collecteur de fractions ou de tubes à essai placés sous le robinet de la colonne.

Applications

La chromatographie sur colonne est largement utilisée pour séparer les composés dans les domaines suivants :

• Chimie organique
• Chimie inorganique
• Biochimie
• Chimie analytique
• Industrie pharmaceutique

Avantages de la chromatographie sur colonne

• Haute résolution de séparation
• Possibilité de séparer des composés ayant des différences d’affinité faibles
• Flexibilité dans le choix de la phase stationnaire et de l’éluant
• Méthode relativement simple à mettre en œuvre