Quel est le principe de fonctionnement de la chromatographie ?

Principe de fonctionnement de la chromatographie

La chromatographie est une technique d’analyse utilisée pour séparer les composants d’un mélange en exploitant leurs différences d’interaction avec deux phases : une phase stationnaire fixe et une phase mobile en mouvement.

Phases stationnaire et mobile

La phase stationnaire est une substance immobile qui reste en place dans le système chromatographique. Elle peut être un solide, un liquide ou un gaz.

La phase mobile est une substance qui se déplace à travers la phase stationnaire, entraînant le mélange à analyser. Elle peut être un liquide, un gaz ou un fluide supercritique.

Mécanisme de séparation

Les composants du mélange interagissent différemment avec les phases stationnaire et mobile en fonction de leurs propriétés physico-chimiques, telles que la polarité, la taille et le poids moléculaire.

• Phase stationnaire : Les composants interagissent avec la phase stationnaire par des liaisons chimiques (par exemple, par adsorption, échange d’ions ou affinité) ou par des interactions physiques (par exemple, tamisage moléculaire).
• Phase mobile : Les composants interagissent avec la phase mobile par des forces solvant-soluté (par exemple, des interactions dipolaire-dipolaire ou des liaisons hydrogène).

Ces interactions différentielles entraînent des vitesses de migration différentes pour les différents composants. Les composants qui interagissent fortement avec la phase stationnaire se déplaceront lentement, tandis que ceux qui interagissent faiblement se déplaceront plus rapidement.

Séparation

Au fur et à mesure que la phase mobile se déplace dans le système chromatographique, les composants du mélange se séparent en fonction de leurs vitesses de migration. Les composants les plus fortement retenus par la phase stationnaire seront élués (sortiront du système) en dernier, tandis que les composants les plus faiblement retenus seront élués en premier.

La séparation peut être visuelle (par exemple, dans la chromatographie sur couche mince) ou détectée par des moyens instrumentaux (par exemple, dans la chromatographie en phase liquide à haute performance).

Applications

La chromatographie a de nombreuses applications, notamment :

• Identification et quantification de composés dans des mélanges complexes
• Purification et isolement de composés spécifiques
• Analyse de la structure et de la composition des molécules
• Surveillance de la qualité des produits
• Contrôle des processus